GeneHero? sgRNA 文庫
復能基因為您提供 CRISPR sgRNA 文庫,用于高通量敲除特定或者客戶指定的人類基因族基因或通路基因。通過基因敲除實現的功能缺失型篩選是哺乳動物細胞系統(tǒng)基因分析、促進基因研究、基因組級別功能調查(如信號轉導通路)以及藥物研究(如靶標甄別和藥物機制研究)的強大工具。
產品優(yōu)勢
每個 sgRNA 文庫克隆都是單獨構建,經過測序驗證后再混合,以保證文庫的質量及對目的基因家族的 sgRNA 表現度。
可提供預制或定制 sgRNA 文庫。
每個目的基因設計2條或更多 sgRNA。sgRNA克隆
多種產品規(guī)格可供選擇,如慢病毒顆?;旌衔膸?、轉染級質粒DNA混合文庫或菌種混合文庫。
GeneHero? 人類 sgRNA 文庫使用慢病毒載體,可通過兩種不同方法(直接轉染或包慢病毒顆粒后轉導)實現大規(guī)模功能篩選。對于每個目的基因,我們會至少設計2個sgRNA 分別靶向基因的不同序列區(qū)(極少數基因由于序列限制只能設置1條 sgRNA)。這些 sgRNA 序列都經過設計優(yōu)化及測序驗證,確保高效的基因敲除。您可以選擇訂購分別針對不同基因家族的標準混合文庫,或根據您的實驗需要定制屬于您的文庫組合。文庫目前提供慢病毒顆粒、轉染級質粒 DNA 以及菌種等三種形式。它們能轉染或轉導多種細胞系,包括 Cas9 核酸酶穩(wěn)定表達細胞系。
圖 1. 使用 sgRNA 文庫進行大規(guī)模篩選的示意圖
產品應用
使用大量 sgRNA 分別或混合進行高通量基因敲除篩選
藥物靶標研究(圖2)
表型篩選
綜合致死性篩選
圖 2. GeneHero? sgRNA 文庫應用流程。 A:混合文庫篩選。對感染了sgRNA混合文庫的細胞株進行篩選,獲取具備目的表型的陽性細胞株進行Sanger測序識別對應的sgRNA,或通過深度測序搜索比例過高或過低的sgRNA。B:使用 sgRNAs 文庫array(獨立克隆文庫)進行基因敲除篩選。各板孔里的細胞株分別感染不同的sgRNA慢病毒顆粒,并篩選具備目的表型的陽性細胞株。如此無需測序即可獲知與目的表型相關的sgRNA。
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